Colilert(科立得) 24小時即可定性/定量檢測總大腸菌群(Coliform)和大腸埃希氏菌(E.Coli)
愛德士的科立得® 試劑在全球廣泛的被使用在檢測水中總大腸菌群、大腸埃希氏菌以及耐熱大腸菌群（糞大腸菌群）。在美國, 90 ％以上的實驗室使用科立得® 的專利[固定底物技術酶底物法] (Defined Substrate Technology, DST®) 。在美國、加拿大與日本的飲用水市場科立得® 的使用率事實上大于其它所有檢驗方法的總和。。
科立得™ 獲得美國環(huán)保署的認可，并列為《水與廢水檢驗標準測試方法》。在中國，科立得™是**商品化的固定底物技術酶底物法而列入中國國家標準《生活飲用水標準檢驗方法》（GB/T5750.12-2006）。
如何使用科立得®
定性測試（P/A）
**步
在100ml水樣中加入科立得®試劑，混勻，36℃±1培養(yǎng)24h。
第二步判讀結果
無色=陰性
黃色=總大腸菌群陽性
黃色＋熒光=大腸埃希氏菌陽性
注：耐熱大腸菌群（糞大腸菌群）需44.5℃培養(yǎng)24h后，觀察黃色為陽性
定量檢測
**步
在100ml水樣中加入科立得®試劑，混勻
第二步
倒入Quanti-Tray™（51孔）或者 Quanti-Tray™/2000 （97孔）定量盤中
第三步
用程控定量封口機對定量盤進行封裝，36℃±1℃培養(yǎng)24小時
第四步
Quanti-Tray™ 51 孔定量盤結果判讀
無色=陰性
黃色格子=總大腸菌群
黃色＋熒光格子=大腸埃希氏菌
對照MPN表計算結果
注：耐熱大腸菌群（糞大腸菌群）需44.5℃培養(yǎng)24h后，觀察黃色格子，為陽性結果，對照MPN表
Quanti-Tray™/2000 97孔定量盤結果判讀
無色=陰性
黃色格子=總大腸菌群
黃色＋熒光格子=大腸埃希氏菌
對照MPN表計算結果
注：耐熱大腸菌群（糞大腸菌群）需44.5℃培養(yǎng)24h后，觀察黃色格子，對照MPN表
科立得(Colilert)®優(yōu)點 準確/可信 |
精確檢出100ml水樣中單個的活性總大腸菌群和大腸埃希氏菌，以及糞大腸菌群，假陰性率低. 每個單位試劑可抑制200萬個異養(yǎng)細菌，假陽性率低. 消除傳統(tǒng)方法中的主觀判斷影響，準確性高于濾膜法及多管發(fā)酵法. 2006年被列入到《生活飲用水標準檢驗方法》（GB/T5750.12-2006），是**認可的MMO-MUG培養(yǎng)基；經(jīng)美國環(huán)保署的認可作為24 小時檢驗出廠水與源水中總大腸菌群和大腸埃希氏菌或耐熱大腸菌群（糞大腸菌群）的方法；通過水與廢水檢驗的標準方法分析化學工作者協(xié)會 (AOAC) 、國際瓶裝水協(xié)會 (IBWA) 及歐洲瓶裝水協(xié)會 (EBWA)認證；美國、加拿大、英國、德國、法國、日本、韓國、阿根廷、巴西、澳大利亞、新西蘭、南非等50多國家及地區(qū)的飲用水，地表水，污水等檢驗標準. 年全球使用量超過數(shù)千萬次，美國90%以上的實驗室使用科立得®。 |
簡單/快捷 |
檢測總大腸菌群和大腸埃希氏菌時間不超過24小時，2個指標一次完成，無需確認試驗 簡單培訓就能輕松使用，手工操作少于一分鐘. 不會因為過濾阻塞（濾膜法）或異樣細胞的干擾（多管法）而進行重復測試. 科立得®和51或97孔定量盤聯(lián)合使用，不用稀釋可以定量檢測100ml水中1~200個或1~2419個目標細菌. 無需玻璃器皿清洗及菌落計數(shù). |
科學性：科立得(Colilert)®的工作原理
科立得®的成分是受專利保護的MMO-MUG選擇性培養(yǎng)基（Minimal Media ONPG-MUG）。
當科立得®加入含有總大腸菌群細菌組的水樣，目標細菌在MMO-MUG培養(yǎng)基中繁殖，大腸菌群細菌組產(chǎn)生的特異性生物酶β－半乳糖苷酶能分解MMO-MUG培養(yǎng)基中的色原底物ONPG，使培養(yǎng)基呈現(xiàn)黃色反應；同時水樣中大腸埃希氏菌產(chǎn)生特異性的β－葡萄糖醛酸酶分解MMO-MUG培養(yǎng)基中的熒光底物MUG，產(chǎn)生特征性熒光。同樣原理，耐熱大腸菌群（糞大腸菌群）在培養(yǎng)44.5℃時會分解MMO-MUG培養(yǎng)基中的色原底物ONPG，使培養(yǎng)基呈現(xiàn)黃色反應。
大腸桿菌以β-葡糖醛糖苷酶代謝甲基香豆基葡糖醛酸苷（MUG）產(chǎn)生螢光。因為大多數(shù)非─大腸桿菌屬菌類沒有這些酶，所以無法在科立得® 里生長及干涉這些物質(zhì)。
有這些酶的少數(shù)非─大腸桿菌屬菌類會受到科立得® 特殊配方的基質(zhì)選擇性的抑制作用。
科立得®可以定性檢測水中大腸菌群和大腸埃希氏菌以及糞大腸菌群。當水樣中少數(shù)非目標細菌的生物酶試圖和ONPG或MUG反應，干擾檢測結果時， MMO-MUG培養(yǎng)基中特殊配方的基質(zhì)會抑制其反應進程，控制假陽性的產(chǎn)生；同時，這些特殊配方基質(zhì)可以有效促進目標細菌的生物酶和底物反應，所以假陰性發(fā)生率比傳統(tǒng)方法更低。這就是采用固定底物技術（DST）的酶底物法，及其專利的MMO-MUG培養(yǎng)基。如果聯(lián)合Quanti-Tray™（51孔定量盤）或者Quanti-Tray™2000（97孔定量盤）使用，可以定量檢測100ml水中1~200個或1~2419個目標細菌，而不要稀釋，這就是固定底物技術（DST）酶底物法的多孔定量盤法。
普通的酶底物法采用ONPG-MUG培養(yǎng)基，而非MMO-MUG培養(yǎng)基，不能有效降低假陽性和假陰性的產(chǎn)生，也并非《生活飲用水標準檢驗方法》（GB/T5750.12-2006）的國標檢測方法。
所有的愛德士「指定受檢物檢驗技術」（DST®）試劑都可用于定性測試（P/A）檢驗容器、 Quanti-Tray™ 定量盤或 Quanti-Tray™ 定量盤/2000 檢驗盤里。
科立得(Colilert)®問答集
科立得®的貯存條件是什么？
2-30°C避光儲存。
科立得® 陽性比色盤是什么？
科立得® 陽性比色盤是一種液體的比色劑。目的在于協(xié)助區(qū)別結果是否顯陽性。
科立得® 陽性比色盤如何使用？
在24-28小時期間，使用比色盤對照每個反應的樣品。當檢測結果顏色變化或者熒光顯色不明顯時，將比色盤與檢測結果比較，任何與比色盤顏色相同或更強的黃色及螢光都考慮為陽性結果。
科立得® 試劑應該是什么顏色？
科立得® 試劑應該是干燥，流動性的，白色或略帶灰 (或黃) 色的白色。如遇到任何有關試劑顏色或有效性的問題請您與愛德士技術服務部門聯(lián)絡。
科立得® 檢測結果在28 小時后判讀準確嗎？
定性試驗時，如果是陰性結果就有效。做定量檢測時，如果科立得® 超過培養(yǎng)時間，沒有任何顏色變化是有效的陰性檢驗結果；超過 28 小時出現(xiàn)黃色是無效的結果，應重新檢驗。
科立得®檢測結果在24 小時內(nèi)判讀準確嗎？
定性試驗，如果培養(yǎng)未滿24小時，而樣品中總大腸菌群以及大腸埃希氏菌都顯陽性，則此結果有效；如果只是大腸菌群呈陽性（黃色），則可證明總大腸菌群結果有效，還需要等到24小時后判斷是否含有大腸埃希氏菌。
為何水樣要培養(yǎng) 24-28 小時？
科立得®試劑中添加的抑制與ONPG和MUG反應的非大腸菌群屬的抑制劑最多可以作用到28小時，如果超過了28小時，一些干擾細菌就會克服科立得®的抑制系統(tǒng)而與 ONPG 或 MUG 起反應。超過28小時的陰性結果有效，但是陽性結果需要進行確認試驗。
可以使用科立得®進行定量檢測嗎？
可以，科立得®可用 Quanti-Tray™（51孔）定量盤 ,Quanti-Tray™ 2000（97孔）定量盤進行定量檢測。
科立得®是否是中國國家標準方法？
是，科立得®已經(jīng)列入中國《生活飲用水標準檢測方法》GB/T5750.12-2006，是**商品化的固定底物技術酶底物法，其成分是MMO-MUG培養(yǎng)基，并受專利保護。
科立得®的最低檢出線是多少？
科立得®能檢測出100ml水樣中的1個總大腸菌群與大腸埃希氏菌以及糞大腸菌群菌體。
科立得®的貯存期有多久？
科立得®的貯存期從制造日期算起，科立得®可貯存18個月。
部分附件
Quanti-Tray定量程控封口機
Quanti-Tray 51孔定量盤橡膠襯墊或 Quanti-Tray 97孔定量盤橡膠襯墊
Quanti-Tray 51孔定量盤或 Quanti-Tray 2000 97孔定量盤®
Colilert 51孔陽性比色盤或 Colilert 97孔陽性比色盤
Colilert定性陽性比色瓶
取樣瓶
紫外燈
培養(yǎng)箱
